Los opioides como péptidos ancestrales: estudio inmunohistoquímico en el molusco Helix aspersa y en el anfibio Ambystoma mexicanum / Opioids as ancestral peptides: inmunohistochemical study in the Helix aspersa mollusk and in the amphibious Ambystoma mexicanum

Existe una variedad de estudios multidisciplinarios de tipo farmacológico, fisiológico e inmunohistoquímico que han sido de gran utilidad en las investigaciones de la biología comparada de los péptidos opioides, y las posibles funciones en las que participan a lo largo de la escala filogenética. Se ha encontrado que estos péptidos y sus receptores específicos, se han mantenido estables a través de la evolución. Además, se ha demostrado que los opioides están distribuidos ampliamente a lo largo de la escala filogénetica. Nuestro grupo ha realizado estudios inmunohistoquímicos para leucina encefalina, metionina encefalia, dinorfina 1-8 y beta-endorfina en dos especies: el caracol de jardín Helix aspersa y el ajolote Ambystoma mexicanum. Los resultados obtenidos en el Helix aspersa mostraron inmunorreactividad a la leucina encefalina en interneuronas de la vía sensorial del tentáculo, en interneuronas de los ganglios parietales, y en neuronas neurosecretoras del cuerpo dorsal del mesocerebro, principalmente. La inmunorreactividad a metionina tuvo una distribución más amplia. Se encontró que la inmunorreactividad a encefalinas tiene una variación estacional. Así mismo, se encontró por medio de inmunohistoquímica y HPLC, inmunorreactividad al octapéptido Met-5Arg-Gly-Leu en el anillo periesofágico de este organismo. Se estudió la liberación de encefalinas en estos ganglios y se encontró que es provocada por alto potasio y dependiente de calcio. En el Ambystoma mexicanum se demostró la existencia de inmunorreactividad a metionina encefalina a dinorfina, se encontró únicamente en fibras de la eminencia media y el lóbulo posterior; la inmunorreactividad a leucina encefalina se distribuyó en algunas fibras del lóbulo posterior y de la eminencia media, y en una gran cantidad de células del lóbulo anterior. Este último hallazgo sugirió que este péptido pudiera tener un papel hormonal. La distribución de encefalinas en el cerebro del A. mexicanum fue muy similar a la encontrada en los mamíferos y otros vertebrados. En telencéfalo, la concentración principalmente en el complejo estrioamigdalino y en la región septal. En diencéfalo, se localizó en los núcleos habenulares e hipotalámicos. De los datos presentados en este trabajo, se pudo conluir que los péptidos opioides tienen una distribución parecida en organismos representativos de diferentes grupos taxonómicos, y cuya función es similar dentro de estos grupos

Localization of the microelectrode tip combining a rapid procedure method and marking with pontamine sky blue

Uno de los aspectos más relevantes del registro de la actividad unitaria celular en mamíferos, es la localización precisa de los sitios registrados. El asignar a las neuronas o grupos neuronales una colección definida, muchas veces permite establecer la función que estas estructuras tienen en el SNC. Es por esto que hemos desarrollado un método para identificar las neuromas estudiadas, utilizando micropipetas de vidrio que contienen una solución de azul de pontamina al 4% ne KCL 1M. Al finalizar los registros de actividad neuronal unitaria se hace una inyección iontofeorética, se sacrifican los animales, se fijan y se corta el tejido en microtomo de congelación. Se aplica la técnica de procedimiento rápido para obtener una fotografía de la zona de interés. Este método es fácil y rapido de realizar, y tiene la ventaja de que los mismos cortes del tejido pueden ser usados para procedimientos histológicos posteriores